Media Brillian Green Lactose Broth (BGLB)

Media yang digunakan untuk mendeteksi bakteri coliform (Gram negatif) di dalam air, makanan, dan produk lainnya. Media ini dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan menggiatkan pertumbuhan bakteri coliform. Ada atau tidaknya bakteri coliform ditandai dengan terbentuknya asam dan gas yang disebabkan karena fermentasi laktosa oleh bakteri golongan coli (Munif,A. 2012).

Media Brillian Green Lactose Broth (BGLB)

Media Brillian Green Lactose Broth (BGLB) khususnya digunakan untuk pemeriksaan MPN coliform, yaitu pemeriksaan yang digunakan untuk mengetahui perkiraan jumlah terdekat bakteri coli dan coliform dalam 100ml sampel. Penggunaan media BGLB ini digunakan pada tahap uji penguat. Media ini digunakan dengan maksud untuk media penyubur bagi bakteri coliform sekaligus sebagai media selektif bagi bakteri selain bakteri coliform. Dengan komposisi media yang mengandung laktossa dan garam empedu inilah yang dapat mengizinkan dan mendorong bakteri-bakteri coliform untuk tumbuh secara optimal.

Media BGLB ini dapat diklasifikasikan berdasarkan atas susunan kimiawi, konsistensi atau kepadatannya, wadah yang digunakan serta fungsinya.

• Berdasarkan susunan kimiawi, termasuk media sintetis karena semua komponen penyusunnya merupakan zat kimia. 
• Berdasarkan konsistensi atau kepadatannya, termasuk media cair (broth) karena tidak mengandung agar. 
• Berdasarkan wadah atau tempatnya termasuk media tabung karena disimpan dalam tabung reaksi. 
• Berdasarkan fungsinya, termasuk media selektif untuk pertumbuhan bakteri Coliform, menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif (Edi Sukarman, 2012).

Pembuatan Media BGLB

• Disiapkan semua alat-alat dan bahan-bahan yang akan digunakan. 
• Ditimbang serbuk media BGLB sebanyak 8 gram. 
• Dilarutkan dengan aquadest sebanyak 200 ml. 
• Dihomogenkan larutan dengan bantuan pemanasan dan pengadukan. 
• Pelarutan tidak boleh sampai mendidih ( pelarutan harus sempurna sehingga tidak ada kristal yang bersisa). 
• Dipipet media sebanyak 10 ml ke dalam tabung reaksi yang telah diisi tabung durham dengan posisi terbalik. 
• Diautoclave 121⁰ C selama 15 menit. 
• Dikeluarkan larutan dari autoclave, saat suhu sudah rendah ( 20⁰ C) dan tekanan telah turun ( dilihat indicator autoclave). 
• Jika tidak segera digunakan, dibungkus dengan kertas, kemudian disimpan pada almari es.

 

Media BGLB merupakan media yang digunakan untuk uji bakteri coliform yang biasanya terdapat pada air minum, air limbah, makanan dan produk susu serta produk lain yang menjadi perhatian sanitasi. Komposisi media ini adalah petone untuk menyediakan nitrogen , vitamin, mineral dan asam amino esensisal untuk pertumbuhan bakteri, laktosa merupakan karbohidrat  yang difermentasi sehingga dapat menyediakan karbon dan energi. Oxbile dan brilliant ngreen  dapat menghambat bakteri gram positif dan bakteri garm negatif kecuali coliform. Media BGLB dibuat dengan menimbang bubuk media sebanyak 8 g dan dilarutkan dengan aquadest  sebanyak 200 ml, warna dari media BGLB adalah hijau tua . Kemudian dipanaskan dengan kompor listrik sampai homogen, dan di cek pH media BGLB yakni 7,4 ±  0,2  setelah itu di tuang media BGLB kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham (posisi terbalik) sebanyak 10 ml, dan  dipastikan tidak terdapat gelembung udara dalam tabung durham. Kemudian di tutup tabung reaksi dengan kapas berlemak dan kertas buram untuk selanjutnya disterilisasi di autoclave dengan suhu 121ºC selama 15 menit. Jika tidak segera digunakan media disimpan dalam kulkas.

Khusus untuk media yang menggunakan tabung durham ada beberapa hal yang harus diperhatikan dalam pembuatannya, antara lain:

• Seluruh bagian tabung durham harus terendam oleh media. 
• Tidak boleh ada gelembung udara dalam tabung udara. 
• Tabung durham harus menyentuh dasar tabung reaksi yang digunakan.

DAFTAR PUSTAKA

Ciefa, 2011, Media Penanaman Bakteri, online,http://ciefachubbie.blogspot.com/2011/10n /media -penanaman-bakteri.html,  12 September 2013

Edi Sukarman, 2012, Media dan Reagensia, online,http://edisukarman.  blogspot.com/2012/06 makalah-media-dan-reagensia-media.html, 14 September 2013

L.Lee, 2011, Media dan Reagensia, online,http://imlee91.blogspot.com/2011/04/media-dan-reagensia-part-1.html , 5 Desember 2012

Mikrobiologi Laboratorium, 2011, Komposisi media bakteri, Online, http://inst.bact.wisc. edu/inst/index.php?module=Book&func=displayarticle&art_id=280, 14 September 2013

Munif,A, 2012, Bakteri Coliform dan Coli, Online, http:// environmentalsanitation. wordpress.com /2012/12/24/bakteri-coliform-dan-e-coli/, 14 September 2013

Mursalim Achmad, 2009, Media dan Reagensia, Online, http://masselekang.blogspot.com/2009/06/media-dan-reagensia.html, 12 September 2013

Pradhika, 2012, Media Pertumbuhan Mikroorganisme, Online, http://praktikmikrobiologi. blogspot.com/2012/10/media-pertumbuhan-mikroorganisme-bagian.html, 14 September 2013

Yusra, 2012, Pengantar Media dan Reagensia, Online, http://yusramitharokerzforever.blogspot.com/2012/06/media-adalah-suatu-campuran-bahan-yang.html, 12 September 2013