Media adalah suatu campuran bahan yang mengandung nutrisi
untuk pembiakkan/pertumbuhan, mempertahankan dan menyeleksi bakteri yang
dibiakkan secara invintro ( di luar tubuh) sehingga diketahui jenis bakterinya
( Edi Sukarman, 2012). Agar TCBS ( Thiosulfate Citrate Bile Salt Sucrose)
adalah medium selektif yang digunakan untuk isolasi spesies vibrio dari
specimen berak ( stool) yang mengaduk bakteri campuran. Agar TCBS juga
membedakan produksi karakteristik koloni dari spesies vibrio. Vibrio spp tumbuh
kerdil pada media yang dirancang untuk isolasi Salmonella dan Shigella dengan
menghasilkan koloni tak berwarna pada MCA. Agar TCBS mengandung Na. sitrat, Na.
tiosulfat, dan ox-gall ( 10% larutan yang bersama-sama menghambat pertumbuhan
beberapa bakteri gram-positif kokus dan gram – negative batang yang normal ada
dalam feses.
 |
| Media TCBS |
Untuk membuat media TCBS ditimbang bubuk agar TCBS dengan
menggunakan neraca analitik. Aquades dimasukkan dalam Erlenmeyer untuk
disterlisasi dalam autoclave dengan suhu 121 °C selama 15 menit. Setelah
itu, sebelum menggunakan gelas ukur, terlebih dahulu dibilas dengan aquades
steril. Aquades steril dituangkan dalam gelas ukur. Erlenmeyer yang sudah
melewati tahap sterilisasi dalam oven, dimasukkan TCBS Agar menggunakan spatel,
namun spatel harus difiksasi terlebih dahulu, agar tetap steril. Dituangkan aquades
steril ke dalam Erlenmeyer yang berisi TCBS Agar. Kemudian diaduk larutan
tersebut dengan batang pengaduk hingga homogen. Setelah itu, apabila masih
terdapat endapan merah bata pada dasar labu Erlenmeyer maka harus dipanaskan
dengan kompor listrik sambil diaduk, hingga muncul sedikit gelembung pada dasar
Erlenmeyer. Kemudian dicek pH larutan menggunakan pH stik, dengan pH media yang
sesuai adalah pH 8,6 ± 0,2 Sebelum dituangkan dalam plate, Erlenmeyer
difiksasi terlebih dahulu lalu dituangkan ke dalam plat. Setelah itu plate
diberi label nama dan tanggal pembuatan media. Media TCBS Agar siap digunakan.
Dalam label kemasan bubuk media TCBS merk OXOID tertera
88 gram bubuk media dilarutkan dengan 1L aquades. Jika kita ingin menggunakan
100 ml aquades maka berat bubuk MCA yang harus ditimbang dapat dihitung sebagai
berikut :
Pada pembuatan media TCBS ini tidak melalui proses
sterilisasi pada autoclave karena dalam TCBS terdapat kandungan atau komposisi
thiosulphate yang berfungsi untuk menghambat bakteri lainnya yang tumbuh pada
media ini karena media ini termasuk media selektif untuk menumbuhkan satu jenis
mikroba tertentu yaitu cholera. Apabila media ini di autoclave maka kandungan
thiosulpate akan terpecah dan tidak bisa memproteksi bakteri yang tumbuh pada
media tersebut. Karena pembuatan media ini tidak menggunakan proses sterilisasi
pada autoclave maka bahan seperti aquadest perlu disterilisasi dalam autoclave
dengan suhu 1210 C selama 15 menit, dan alat yang digunakan seperti Erlenmeyer
disterilisasi dalam oven. Proses sterilisasi ini bertujuan agar media tetap
steril dan tidak terkontaminasi oleh mikroba yang tidak diinginkan. Selain
proses sterilisasi alat dan bahan ini ada juga proses fiksasi pada saat
penuangan media dalam plate, dimana proses fiksasi ini bertujuan untuk tetap
menjaga lingkungan sekitar pada saat penuangan media tetap steril
Kandungan yang terdapat pada TCBS agar antara lain :
- Yeast extract powder 5,0 g
- Bacto peptone 10,0 g
- Sodium thiosulpate 10,0 g
- Sodium citrate 10,0 g
- BTB 0,04 g
- Agar 14,0 g
- Ox Bile 8,0 g
- Sakarose 20,0 g
- Sodium chloride 10,0 g
- Fervic citrate 1,0 g
- TB 0,04 g
 |
| Media TCBS yang sudah ditumbuhi bakteri |
DAFTAR PUSTAKA
EdiSukarman.2012.MediadanReagensia,
online,http://edisukarman.blogspot.com/2012/06
makalah-media-dan-reagensia-media.html
Ciefa.2011.Media Penanaman
Bakteri,oline,http://ciefachubble .blogspot.com /2011/10/
media-penanaman-bakteri,html
0 komentar:
Posting Komentar